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生化試劑盒

支鏈淀粉含量試劑盒-微板法
恒遠生物生化試劑盒應(yīng)用領(lǐng)域廣泛,涉及酶類、氧化應(yīng)激、鐵死亡、肝功能、腎功能、糖酵解、無機鹽離子、脂質(zhì)代謝、植物抗逆性等。檢測樣本類型豐富,涉及多種體液、組織、細胞、食品、植物、藥物、化妝品等。主要的檢測儀器為酶標儀,分光光度計和熒光酶標儀。
我們將以高度的責任感和出色的產(chǎn)品質(zhì)量為客戶提供高效專業(yè)的生化代測服務(wù)和實驗技術(shù)解決方案。豐富的經(jīng)驗、優(yōu)良的品質(zhì)、充足的庫存、準確的交貨時間、極具競爭力的價格,所有這些保證了我們向您提供的最專業(yè)最優(yōu)質(zhì)的服務(wù)。
中文名稱

支鏈淀粉含量試劑盒


規(guī)格 96樣
貨號

E-358-SH

價格 ¥1500
樣本類型 血清,血漿,組織勻漿,細胞裂解液、細胞培養(yǎng)上清液等
檢測范圍 詳見說明書
檢測方法 微板法
貨期 3-5天
說明書 咨詢我司業(yè)務(wù)員獲取
文獻 咨詢我司業(yè)務(wù)員獲取


    正式測定前務(wù)必取2-3個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定

測定意義:

鏈淀粉是具有高度分支的多糖,淀粉中直鏈淀粉和支鏈淀粉的比例和含量對淀粉產(chǎn)品的加工、物化特性、糊化溫度等有著直接的影響,對于不同比例直、支鏈淀粉的淀粉的研究具有重要的意義。

 

測定原理:

利用80%乙醇可以把樣品中可溶性糖與淀粉分開,利用雙波長比色法測定支鏈淀粉含量。

需自備的儀器和用品:

酶標儀/可見分光光度計、水浴、可調(diào)式移液器、96孔板/微量石英比色皿、研缽、冰、乙醚和蒸餾水。

 

試劑的組成和配制:

試劑一:液體100mL×1瓶;4℃保存;

試劑二:乙醚100mL×1瓶;4℃保存;(自備)

試劑三:液體100mL×1瓶;4℃保存;

試劑四:液體2mL×1; 4℃保存;

試劑五:液體300uL×1; 4℃保存;

 

淀粉提取: 

稱取0.01~0.02g烘干樣本(建議稱取約0.01g)于研缽中研碎,加入1mL試劑一,充分勻漿后轉(zhuǎn)移到EP管中,80℃水浴提取30min3000g,25℃離心5min,棄上清,留沉淀,加入1mL試劑二(乙醚)振蕩5min3000g,25℃離心5min,棄上清,留沉淀,加入1mL試劑三充分溶解,90℃水浴10min,冷卻后待測。

 

測定步驟:

1、 分光光度計或酶標儀預(yù)熱30min以上,蒸餾水調(diào)零。

測定管:在96孔板或微量石英比色皿中依次加入20uL樣本, 14uL試劑四,120uL蒸餾水,2uL試劑五,44uL蒸餾水,混勻,分別測定550743nm處吸光值,ΔA測定=A550-A743。

空白管:在96孔板或微量石英比色皿中依次加入20uL試劑三, 14uL試劑四,120uL蒸餾水,2uL試劑五,44uL蒸餾水,混勻,分別測定550743nm處吸光值,ΔA空白=A550-A743

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

支鏈淀粉含量計算:

a. 用微量石英比色皿測定的計算公式如下

標準條件下測定的回歸方程為y=0.1214x+0.0076;x標準品濃度(mg/mL),y吸光。

1按照蛋白濃度計算

支鏈淀粉含量(mg/mg prot)=[(ΔA測定-ΔA空白-0.0076V1]÷0.1214 ÷(V1×Cpr)=8.24×A測定-ΔA空白-0.0076) ÷Cpr

2、按樣本干重計算

支鏈淀粉含量(mg/g干重)= [(ΔA測定-ΔA空白-0.0076V1] ÷0.1214÷(W×V1÷V2) =8.24×A測定-ΔA空白-0.0076) ÷W

V1:加入反應(yīng)體系中樣本體積,0.02mL;V2:加入提取液體積,1 mL;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣質(zhì)量,g

 

b. 96孔板測定的計算公式如下

標準條件下測定的回歸方程為y= 0.0607x+0.0076;x標準品濃度(mg/mL),y吸光

1、按照蛋白濃度計算

支鏈淀粉含量(mg/mg prot)=[(ΔA測定-ΔA空白-0.0076V1]÷0.0607 ÷(V1×Cpr)=16.47×A測定-ΔA空白-0.0076) ÷Cpr

2、按樣本干重計算

支鏈淀粉含量(mg/g干重)= [(ΔA測定-ΔA空白-0.0076V1] ÷0.0607÷(W×V1÷V2) =16.47×A測定-ΔA空白-0.0076) ÷W

V1:加入反應(yīng)體系中樣本體積,0.02mLV2:加入提取液體積,1 mL;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mLW:樣質(zhì)量,g

最低檢測限為10mg/g干重或0.1mg/mgprot。

 

 


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